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已滅菌培養(yǎng)基的保存方法
[日期:2008-07-23] 來源:中國(guó)組培網(wǎng) 作者: 發(fā)表評(píng)論(1)打印
已經(jīng)滅菌完畢的培養(yǎng)基從高壓滅菌鍋中取出后,立即放在平整的臺(tái)面上,若大批量生產(chǎn)可用果箱裝好并標(biāo)記好其用選后,送到接種室,讓其自然冷卻凝固。滅好的培養(yǎng)基最好經(jīng)過3d的預(yù)培養(yǎng),以便觀察培養(yǎng)基是否徹底滅菌,這樣能夠使某些因?yàn)闆]有徹底滅菌的培養(yǎng)基,在接種前被檢出,可避免雜菌污染而造成不必要的損失,這點(diǎn)對(duì)少而重要的材料尤其值得注意。但是在同等條件下經(jīng)多次使用無污染后,就沒必要再擺3d后才使用,而是冷卻凝固后就可使用了。 (1)防塵 已經(jīng)滅好菌的培養(yǎng)基要注意防塵。如果培養(yǎng)基在衛(wèi)生條件差的地方貯存,依附在塵埃中的細(xì)菌、真菌等會(huì)落在培養(yǎng)瓶表面,使用前若不進(jìn)行表面滅菌處理,在接種時(shí)就容易隨著氣流進(jìn)入容器,使其受到污染,影響組織培養(yǎng)工作的順利進(jìn)行,因此培養(yǎng)基必須放在干凈、衛(wèi)生的接種室內(nèi)。 (2)避光 備用培養(yǎng)基應(yīng)貯于光線較暗的房子里面,因?yàn)檫胚嵋宜岬饶承┪镔|(zhì)易見光分解。在光照下,一些培養(yǎng)基添加物的成分也會(huì)發(fā)生變化。在接種室里掛上較厚的窗簾或在培養(yǎng)基的箱子上加蓋厚的黑布,這樣可以使培養(yǎng)基免受光線的影響。 (3)恒溫 培養(yǎng)基冷卻后,可以將其放在10℃左右的冰箱中貯藏3~5周;在大批量生產(chǎn)中可以放在裝有空調(diào)的接種室內(nèi),擺放2周左右,溫度控制在20℃以內(nèi);若擺放時(shí)間為2~5d,溫度不超過28℃即可。但是在培養(yǎng)基擺放過程中溫度不應(yīng)過高,同時(shí)還應(yīng)避免溫度有較大幅度的變化,隨著貯藏室氣溫的升高或降低,裝有培養(yǎng)基容器內(nèi)的空氣會(huì)跟著膨脹或縮小,帶來菌類進(jìn)入培養(yǎng)基,造成貯藏期間培養(yǎng)基的大量污染。 (4)定期更新 培養(yǎng)基不宜長(zhǎng)期貯存,特別是固體培養(yǎng)基。隨著時(shí)間的推移,培養(yǎng)基里的水分以氣態(tài)選出,培養(yǎng)基的含水量便逐漸降低,使培養(yǎng)基的濃度和理化性狀發(fā)生改變,對(duì)以后的外植體培養(yǎng)或植株的繼代轉(zhuǎn)接及生根培養(yǎng)均不利;培養(yǎng)基貯存過長(zhǎng),空氣中夾雜的細(xì)菌、真菌也可能降落到培養(yǎng)基表面引起污染;當(dāng)貯藏含有吲哚乙酸、椰乳等物質(zhì)的培養(yǎng)基時(shí),環(huán)境中的光線會(huì)使吲哚乙酸發(fā)生光解,也會(huì)使椰乳所含的一些成分發(fā)生變化。因此結(jié)合生產(chǎn)任務(wù)做好培養(yǎng)基的配制和使用計(jì)劃十分必要,一般情況下培養(yǎng)基貯存時(shí)間不應(yīng)超過1周。
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