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用葉片培養(yǎng)菊花苗
植物的組織培養(yǎng)通常指所有類型植物的無性培養(yǎng)技術(shù)?捎脕碜鳛榕囵B(yǎng)物的那部分,是植物的器官、組織或細(xì)胞,通稱為外植體。用于商品性生產(chǎn)中的外植體,一般取用植物體的某些器官:如莖尖、葉片,花等。組織培養(yǎng)技術(shù)可使繁殖系數(shù)大大提高,國外在七十年代已開始應(yīng)用于生產(chǎn),國內(nèi)近年來也有用莖節(jié)和花蕾作為外植體培養(yǎng)成功的報道。 江蘇農(nóng)學(xué)院園藝系和江都曹王林園場協(xié)作進(jìn)行的菊花快速繁殖研究,取用的外植體為葉片,具有取材不受季節(jié)限制的優(yōu)點。在工廠化育苗時,可與莖節(jié)、花蕾同時培養(yǎng),以充分利用稀少的品種資源。而在無法取蕾和取莖節(jié)的季節(jié),其葉片仍可作為唯一的材料來源。 試驗結(jié)果,葉片培養(yǎng)的分化率比花蕾略低,而分化系數(shù)與之相當(dāng);與莖節(jié)相比,則二項指標(biāo)皆顯著高于莖節(jié)。葉片培養(yǎng)使用的基本培養(yǎng)基為MS(1982)培養(yǎng)基,添加瓊脂8克/升,蔗糖30克/升,PH調(diào)至5.6-6.0。分化培養(yǎng)基使用的激素為BA(6-芐基氨基嘌呤),和NAA(萘乙酸)初代培養(yǎng)使用的外植體為未老化的嫩葉。表面消毒用70%的酒精,然后進(jìn)一步用0.1%升汞滅菌。無菌水漂洗后,用濾紙吸干水份,剪成0.7至1平方厘米小塊,即可接種。培養(yǎng)室溫度為20~25℃,開始兩周為暗處理,其后為半光照,光照強(qiáng)度2000LUX(照度)。 外植體接種后五天,可見中部隆起,邊緣增厚;兩周時膨大率達(dá)55.2%,并有11%出現(xiàn)愈傷組織,二十天時愈傷組織分化率達(dá)90%以上,個別處理開始分化出小芽和芽叢。接種二個月后統(tǒng)計,最佳處理外植體幼苗分化率達(dá)87.5%,每外植體分化芽數(shù)為8.14個,芽高一般達(dá)2-3厘米,可直接轉(zhuǎn)生根培養(yǎng)。 生根培養(yǎng)基可采用1/4MS培養(yǎng)基,添加激素NAA或IAA(吲哚乙酸)。培養(yǎng)十天后,生根率為83/100%,平均每苗根數(shù)達(dá)5-6條。入土成活率初步試驗為84.2%,經(jīng)過生根培養(yǎng)的無根苗(部分根原基已形成)入土成活率也達(dá)87%,但細(xì)長的瘦弱苗入土成活率較低。從開花情況看,6月20日前人土的都能在11月份正常開花,稍后人土的也在12月陸續(xù)開花。在已開花的品種中,基本都保持了原品種的花色、花形等固有特征,而具有商品生產(chǎn)特性。其中"二喬"這一品種,在頂花保持原有性狀的同時,側(cè)花發(fā)生了綠色變異。從獲得的試管苗植株看,發(fā)生變異的部位均為頂花向下的第十節(jié)位,將其摘除后其上發(fā)生的二次側(cè)蕾仍為綠菊。
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